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【UElandy】细胞膜染料
人阅读 发布时间：2023-08-01 13:59
细胞膜染料
细胞膜主要是由磷脂构成的富有弹性的半透性膜，膜厚8-10nm，对于动物细胞来说，其膜外侧与外界环境相接触。其主要功能是选择性地交换物质，吸收营养物质，排出代谢废物，分泌与运输蛋白质。
图 1. 细胞膜结构[1]
细胞膜染料一般为亲脂性染料，可以用来染细胞膜或其它具有脂溶性的生物结构。这类染料有着很高的淬灭常数和激发态寿命，当其与细胞膜结合后，其荧光强度大大增强，并在整个细胞膜上扩散，最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。
DiA (D4059) / DiO (D4007) / DiO Plus (N4021)
DiA 常用于神经元的示踪，研究发现，某些情况下当 DiO 不能标记固定组织时，DiA 可得到良好标记效果。DiO 在进入细胞膜之前荧光非常弱，当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强，被激发后可以发出绿色荧光，可以用标准的 FITC 滤光片检测。可用于示踪剂或长期示踪剂，通常不会显著影响细胞的生存力；可用于检测细胞的融合和粘附，发育或移植过程中的细胞迁移。DiO Plus 和 DiO 具有几乎相同的吸收光谱和发射光谱，但前者具有更好的膜溶解性，并且不形成非荧光性的聚集体，通常这也会减慢染料在膜上的扩散速率。（图 3）
DiA 常用于神经元的示踪，研究发现，某些情况下当 DiO 不能标记固定组织时，DiA 可得到良好标记效果。DiO 在进入细胞膜之前荧光非常弱，当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强，被激发后可以发出绿色荧光，可以用标准的 FITC 滤光片检测。可用于示踪剂或长期示踪剂，通常不会显著影响细胞的生存力；可用于检测细胞的融合和粘附，发育或移植过程中的细胞迁移。DiO Plus 和 DiO 具有几乎相同的吸收光谱和发射光谱，但前者具有更好的膜溶解性，并且不形成非荧光性的聚集体，通常这也会减慢染料在膜上的扩散速率。（图 3）
图 2. DiO 染色[2]
A：4T1 cells；B：BF cells
图 3. DiO VS DiO Plus 染色
A: DiO；B: DiO Plus
DiI (D4010) / Dlinoleyl DiI (D4053) / Cell Tracker CM-DiI (C4060)
DiI 可用于示踪剂或长期示踪剂，被 DiI 标记的神经细胞在体外培养的条件下可以存活长达 4 周，在体内可以长达一年。可用于检测细胞的融合和粘附，发育或移植过程中的细胞迁移。Dlinoleyl DiI 中含有不饱和烃链，使其比 DiI 在细胞膜上的横向扩散速度更快，广泛应用于神经元组织的追踪。与传统细胞膜探针 DiI 相比较，Cell Tracker CM-DiI 更适于固定后标本的长期示踪，其红色的激发/发射光谱特征可与绿色荧光染料或者绿色荧光蛋白如 GFP 一起用于双标实验。
图 4. DiI 染色[3]，C. neoformans H99 cells
DiD (D4019) / DiR (D4006)
DiD 染料是亲脂性荧光染料家族成员之一，可以用 633 nm He–Ne 激光器激发，具有比 DiI 更长的激发和发射光波长，适合用于标记具本底荧光的细胞和组织。DiR 是一个亲脂性、近红外荧光花青染料，在红外光范围内其本底荧光水平很低，所发射的红外光可以高效地穿过细胞和组织，在体内活体成像或者示踪中很重要。此外，DiD 和 DiR 都可以进行外泌体的标记。
图 5. DiI、DiD 染色[3]
图 6. DiR 标记小鼠外泌体[4]
A：后静脉注射 24 小时，1.01010 p/g DiR EVs（左）和 PBS 处理对照（右）的活小鼠；B：后静脉注射 1.01010 p/g DiR EV 的小鼠 24 小时后，用 CT 扫描进行标记。
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| 货号 | 产品名称 | 选择指南 | 兼容性 | 波长信息 (Ex/Em) | 规格 |
| D4007 | DiO（细胞膜绿色荧光探针） | 绿色亲脂性膜染料。 | 不可兼容染色之后的固定透化。 | 484/501 nm (MeOH) | 10 mg |
| D4059 | DiA（细胞膜绿色荧光探针） | 绿色亲脂性膜染料。 | 491/613 nm (MeOH) | 50 mg | |
| D4010 | DiI（细胞膜橙红色荧光探针） | 橙红色亲脂性膜染料。 | 549/565 nm (MeOH) | 10 mg | |
| D4053 | Dilinoleyl DiI（细胞膜橙红色荧光探针） | 效能等同于FAST DiI。 | 549/565 nm (MeOH) | 5 mg | |
| D4019 | DiD（细胞膜红色荧光探针） | 红色亲脂性膜染料。 | 644/663 nm (MeOH) | 10 mg | |
| D4006 | DiR（细胞膜近红外荧光探针） | 远红色亲脂性膜染料，特别适合小动物活体成像。 | 748/780 nm (MeOH) | 5 mg | |
| C4049 | CytoMBriteTM细胞膜橙红色荧光探针 | DiI液体形式，使用更便捷。 | 549/565 nm (MeOH) | 200 μL | |
| C4050 | CytoMBriteTM 细胞膜红色荧光探针 | DiD液体形式，使用更便捷。 | 644/663 nm (MeOH) | 200 μL | |
| N4021 | DiO Plus（细胞膜绿色荧光探针升级款） | 相较于DiO，具有更好的膜溶解性，并且不形成非荧光性的聚集体，膜扩单速度更快。 | 484/501 nm (MeOH) | 5 mg | |
| C4060S | Cell Tracker CM - DiI（细胞膜橙红色荧光探针） | 适于固定后标本的长期示踪。 | 可兼容染色之后的固定透化。 | 553/570 nm | 20 μg |
| C4060L | 1 mg |
本文参考文献（使用 UElandy 产品）
[2] Inducing Endoplasmic Reticulum Stress to Expose Immunogens: A DNA Tetrahedron Nanoregulator for Enhanced Immunotherapy[J]. Advanced Functional Materials, 2020.
[3] Tang Y , Wang X , Li J , et al. Overcoming the Reticuloendothelial System Barrier to Drug Delivery with a "Don't-Eat-Us" Strategy[J]. ACS Nano, 2019, XXXX(XXX).
[4] Oscar P. B. Wiklander, Joel Z. Nordin, Aisling O'Loughlin, Ylva Gustafsson, Giulia Corso, Imre Mäger, Pieter Vader, Yi Lee, Helena Sork, Yiqi Seow, Nina Heldring, Lydia Alvarez-Erviti, CI Edvard Smith, Katarina Le Blanc, Paolo Macchiarini, Philipp Jungebluth, Matthew J. A. Wood & Samir EL Andaloussi (2015) Extracellular vesicle in vivo biodistribution is determined by cell source, route of administration and targeting, Journal of Extracellular Vesicles, 4:1, DOI: 10.3402/jev.v4.26316
本文参考文献（非 UElandy 产品）
[1]杨倩. 基于仿生物膜的纳米颗粒与细胞膜相互作用的机理研究[D].伊犁师范大学,2021.DOI:10.27808/d.cnki.gylsf.2021.000110.
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